Visi žino, kad yra daug laboratorijų, tad kiek žmonių žino apie PGR laboratorijas? O kokie yra pagrindiniai reikalavimai kuriant PGR laboratorijas? Tada bus VOLAB Xiaobian aptarti su visais~
1, PGR laboratorijos išdėstymas
PGR amplifikacijos tyrimų laboratorija iš esmės suskirstyta į keturias atskiras darbo sritis: reagentų laikymo ir paruošimo sritį, mėginių ruošimo sritį, amplifikacijos reakcijos mišinio paruošimo ir amplifikacijos sritį bei amplifikacijos produktų analizės sritį. Siekiant išvengti kryžminio-užteršimo, į kiekvieną darbo zoną reikia patekti griežtai viena kryptimi, ty tik iš reagento laikymo ir paruošimo zonos → mėginio paruošimo zonos → amplifikacijos reakcijos mišinio paruošimo ir amplifikacijos srities → amplifikacijos produkto analizės srities. Reagento ir mėginio perkėlimas tarp kiekvienos eksperimentinės zonos turėtų būti atliekamas per perdavimo langą.
2. Laboratorinės oro kondicionavimo vėdinimo sistemos projektavimas ir slėgio valdymas
PGR laboratorijoms netaikomi griežti valymo reikalavimai, tačiau norint išvengti kryžminio-užteršimo tarp įvairių eksperimentinių sričių, patartina naudoti pilno srauto oro paskirstymo sistemą. Tuo pačiu metu siuntimo ir išnaudojimo dalis turėtų būti griežtai kontroliuojama, kad būtų užtikrintas kiekvienos eksperimentinės srities slėgio reikalavimai.
2.1, mėginio paruošimo sritis
Pagrindinės operacijos šioje srityje – mėginių konservavimas, nukleorūgščių (RNR, DNR) išskyrimas, saugojimas ir įdėjimas į amplifikacijos reakcijos vamzdelius bei DNR sintezės nustatymas. Slėgio gradiento reikalavimai šioje srityje yra šie: teigiamas slėgis gretimos zonos atžvilgiu, kad būtų išvengta aerozolio užteršimo iš gretimos zonos į šią zoną. Be to, dėl aerozolio{2}}sukelto užteršimo pakrovimo operacijos metu, reikia vengti nereikalingo vaikščiojimo šioje srityje.
2.2. Reagentų laikymo ir paruošimo vieta
Pagrindinės operacijos šioje eksperimentinėje srityje yra laikymo reagentų paruošimas, reagentų išdavimas ir pagrindinių reakcijų mišinių paruošimas. Reagentai ir medžiagos, naudojamos mėginiams ruošti, turi būti gabenamos tiesiai į šią vietą ir neturi patekti per kitas sritis. Reagentų žaliavos turi būti laikomos šioje vietoje ir paruoštos į reikiamus saugojimo reagentus. Griežtų oro slėgio kontrolės reikalavimų nėra.
2.3, amplifikacijos produkto analizės sritis
Pagrindinė operacija šioje srityje yra amplifikuotų fragmentų nustatymas. Ši sritis yra pagrindinis amplifikuoto produkto užteršimo šaltinis. Todėl slėgio gradiento reikalavimai šiai sričiai yra šie: Neigiamas slėgis gretimos zonos atžvilgiu, kad būtų išvengta sustiprintų produktų difuzijos iš srities į kitas sritis.
2.4, amplifikacijos reakcijos mišinio paruošimas ir amplifikacijos zona
Pagrindinė operacija šioje srityje yra DNR amplifikacija. Be to, šioje srityje taip pat galima pridėti paruošto DNR šablono (iš mėginio paruošimo zonos) ir pagrindinio reakcijos mišinio (iš reagentų laikymo ir paruošimo zonos), kad būtų paruoštas reakcijos mišinys ir pan. Slėgio gradiento reikalavimai šioje srityje yra šie: neigiamas slėgis gretimoje srityje, kad būtų išvengta aerozolio nuotėkio iš zonos. Siekiant išvengti aerozolių sukeliamos taršos, reikia kuo labiau sumažinti nereikalingą vaikščiojimą teritorijoje. Atskiros operacijos, pvz., mėginių ėmimas, turėtų būti atliekamos švariame stende.
3.1. Griežtas darbo srities padalijimas
(1) Kiekvienos eksperimentinės srities nustatymas yra pagrįstas;
(2) Kiekviena eksperimentinė zona turi turėti akivaizdžius ženklus (pvz., ryškūs namų numeriai ar skirtingos pagrindo spalvos ir tt), kad būtų išvengta įrangos ir reagentų painiavos skirtingose eksperimentinėse srityse.
3.2, pagrįsti sistemos nustatymai
(1) Tinkamas oro kondicionavimo vėdinimo sistemos nustatymas, pabandykite naudoti visą-send oro-kondicionavimo sistemą;
(2) Griežta oro srauto slėgio kontrolė užtikrina skirtingus slėgio reikalavimus skirtingose eksperimentinėse srityse.
3.3, standartinė operacija
(1) Amplifikacijos tikrinimo laboratorijos technikai turi atlikti -darbo mokymą- ir atlikti klinikinius genų amplifikacijos tyrimus gali tik išklausę mokymą;
(2) Eksperimento metu operatorius privalo mūvėti pirštines ir jas dažnai keisti. Be to, vienkartinių dangtelių naudojimas eksploatacijos metu taip pat yra veiksminga užteršimo prevencijos priemonė;
(3) Valymo darbai atliekami laiku ir teisingai. Pasibaigus eksperimentui, vieta turi būti nedelsiant išvalyta. Be įprastų dezinfekuojamųjų skysčių paviršiams dezinfekuoti arba ultravioletinių lempų švitinimo ir dezinfekcijos, kai kuri eksperimentinė įranga taip pat turėtų būti sterilizuojama aukštu slėgiu.
3.4, griežtas valdymas
(1) Griežtai kontroliuoti į laboratoriją įeinantį ir iš jos išeinantį personalą. Asmenys, nesusiję su eksperimentu, negali įeiti ir išeiti iš laboratorijos savo nuožiūra, o prireikus turi įrengti atskirus praėjimus ir duris į ir iš visos eksperimentinės teritorijos.
(2) Sumažinkite nereikalingą vaikščiojimą eksperimentinėje zonoje, kad sumažintumėte kryžminio užteršimo galimybę.
(3) Padauginto produkto analizės sritis yra svarbiausias amplifikuoto produkto užteršimo šaltinis. Atliekų tirpalo negalima pilti į laboratoriją. Jis turi būti mirkomas dezinfekavimo tirpale ir išmestas į vietą, esančią atokiau nuo laboratorijos. Panaudoti antgaliai yra vienkartiniai. Medžiagas taip pat reikia dezinfekuoti ir sterilizuoti, o paskui vienodai apdoroti, pavyzdžiui, sudeginti;
(4) Amplifikacijos produktų analizės srityje gali būti naudojamos tam tikros genų mutacijos ir toksiškos medžiagos, todėl ypatingas dėmesys turėtų būti skiriamas eksperimentuojančiojo saugai.
3.5. Pilna laboratorinė įranga
Sukomplektuotos laboratorijos pagalbinės patalpos yra būtinos sąlygos eksperimentiniam darbui užtikrinti. Atitinkama įranga ir instrumentai turėtų būti įrengti atsižvelgiant į skirtingą kiekvienos laboratorijos eksperimentinį turinį, pvz., itin švarūs suolai, centrifugos ir mėginių tiektuvai.